隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展,越來(lái)越多的天然產(chǎn)物、藥物候選化合物以及化學(xué)品需要進(jìn)行高效、純凈的分離和提純。中壓制備色譜(MPLC)作為一種強(qiáng)大的分離純化工具,已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品等領(lǐng)域。
中壓制備色譜是介于傳統(tǒng)的高效液相色譜(HPLC)和制備液相色譜(Preparative LC)之間的一種技術(shù)。與HPLC相比,MPLC的樣品裝載量更高,分離速度也更快;而與Preparative LC相比,MPLC則更加靈活方便,且使用的操作流程和耗材成本相對(duì)較低。
中壓制備色譜的基本原理是將混合物通過(guò)固定在柱子中的吸附劑進(jìn)行分離。首先,混合物中的組分會(huì)根據(jù)其性質(zhì)與吸附劑相互作用,隨后通過(guò)改變流動(dòng)相的化學(xué)性質(zhì),如溶劑類(lèi)型、酸堿度等,使得吸附劑與樣品組分解離,達(dá)到分離目的。
中壓制備色譜通常采用壓力泵作為流動(dòng)相的驅(qū)動(dòng)力,使得樣品在柱子內(nèi)不斷流動(dòng),并通過(guò)吸附劑與混合物中的目標(biāo)化合物進(jìn)行非特異性結(jié)合。隨后,需要通過(guò)改變流動(dòng)相來(lái)引起吸附劑與目標(biāo)化合物之間的解離,從而實(shí)現(xiàn)分離和純化。常用的流動(dòng)相是溶液體系,包括了酸性、堿性、有機(jī)溶劑、水等成分,這些成分的調(diào)整可以提高目標(biāo)化合物與吸附劑之間的親和力,并促進(jìn)目標(biāo)化合物的分離。
中壓制備色譜具有許多優(yōu)點(diǎn)。首先,其樣品裝載量比HPLC和Preparative LC都要高。其次,MPLC的操作過(guò)程簡(jiǎn)單,成本較低,且易于維護(hù)。同時(shí),由于使用的是固定在柱子中的吸附劑,因此MPLC可重復(fù)使用,而不會(huì)對(duì)環(huán)境產(chǎn)生過(guò)多的廢棄物。
中壓制備色譜的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛。在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,它被廣泛用于蛋白質(zhì)和酶的分離、寡核苷酸的純化、單克隆抗體的制備等方面;在天然產(chǎn)物和食品領(lǐng)域,MPLC被用于提取和分離植物、動(dòng)物、微生物等來(lái)源的天然產(chǎn)物和營(yíng)養(yǎng)成分。