一、高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。
二、特點(diǎn)分析:
?、俑邏海毫鲃?dòng)相為液體,流經(jīng)色譜柱時(shí),受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對(duì)載液加高壓。
?、诟咚伲悍治鏊俣瓤臁⑤d液流速快,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,通常分析一個(gè)樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時(shí)。
?、鄹咝В悍蛛x效能高??蛇x擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
④應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析,特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,顯示出優(yōu)勢。
?、葜涌煞磸?fù)使用:用一根柱子可分離不同化合物。
三、原理:
(1)流動(dòng)相為液體,固定相為吸附劑(如硅膠、氧化鋁等)。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來進(jìn)行分離的。其作用機(jī)制是:當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱時(shí),溶質(zhì)分子(X)和溶劑分子(S)對(duì)吸附劑表面活性中心發(fā)生競爭吸附(未進(jìn)樣時(shí),所有的吸附劑活性中心吸附的是S),可表示如下:XmnSa======XanSm
(2)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動(dòng)相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換,依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。