ELISA試劑盒成果解析方式
發(fā)布日期：2019-04-19 瀏覽次數(shù)：888
這對于試驗(yàn)室科研工作者來說，試驗(yàn)細(xì)節(jié)使非常重要的。在ELISA試劑盒試驗(yàn)中的各項(xiàng)操作細(xì)節(jié)有許多，如盡量少用排槍、勤換槍頭，加樣時(shí)由低濃度向高濃度加，因?yàn)檫@樣能夠削減跳孔的幾率。而整個(gè)試驗(yàn)的后關(guān)鍵就是成果的處理辦法了，那么在今天就為您帶來的是ELISA試劑盒成果解析方式。
1、ELISA試驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔，然后計(jì)算每個(gè)濃度規(guī)范品的均勻OD值，復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
2、均勻OD值減去空白孔的OD值。
3、制造規(guī)范曲線。
以減去本底后的OD值為X軸，規(guī)范品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個(gè)適宜的計(jì)算辦法。主張運(yùn)用適宜的軟件來作圖，比方CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出許多種辦法(比方直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中挑選一條zui適宜的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)符合，能夠?qū)⒁?guī)范品的濃度作為未知數(shù)，將對應(yīng)的OD值帶入該方程，計(jì)算出規(guī)范品的濃度，得到的成果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。挑選擬合度zui高的那條曲線。
假如出現(xiàn)規(guī)范曲線的線性欠好，或平行性欠好(雙孔對照孔的OD值差別很大)，或出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象，可能引起的原因有酶標(biāo)板孔間相互污染、洗板后未能趕快進(jìn)行下一步操作、增加樣品或其它試劑時(shí)操作的辦法不對、孵育方位避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標(biāo)板孔問參加的試劑量不同，相對應(yīng)的解決辦法是加樣時(shí)請當(dāng)心勿將液體濺人另一孔中，人工洗板時(shí)也請當(dāng)心，勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時(shí)進(jìn)行下一步操作、增加試劑時(shí)請懸空滴入，切記勿將槍頭接觸到板孔內(nèi)，汲取不同試劑瓶中的液體時(shí)就要更換一次槍頭、承認(rèn)孵育環(huán)境不透光，蓋板膜將酶標(biāo)板密封好、運(yùn)用已校正過的微量加樣器，如將*次參加液體時(shí)槍頭上留有一滴的液體滴下，那么將以后槍頭上留有的液體也滴下，以確保參加液體體積的一致性。
