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HPLC色譜概述液相色譜法(HPLC)是上個(gè)世紀(jì)七十年代迅速發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)快速的分析分離技術(shù)，是現(xiàn)代分離測(cè)試的重要手段。色譜法的分離原理是：溶于流動(dòng)相(mobilephase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相(stationphase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。HPLC是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，其以液體作為流動(dòng)相，并采用顆粒極細(xì)的固定相的柱色譜分離技術(shù)。其分離機(jī)制與...

高效液相色譜法的發(fā)展歷史1960年代，由于氣相色譜對(duì)高沸點(diǎn)有機(jī)物分析的局限性，為了分離蛋白質(zhì)、核酸等不易氣化的大分子物質(zhì)，氣相色譜的理論和方法被重新引入經(jīng)典液相色譜。1960年代末科克蘭（Kirkland）、哈伯、荷瓦斯(Horvath)、莆黑斯、里普斯克等人開(kāi)發(fā)了世界一臺(tái)高效液相色譜儀，開(kāi)啟了高效液相色譜的時(shí)代。高效液相色譜使用粒徑更細(xì)的固定相填充色譜柱，提高色譜柱的塔板數(shù)，以高壓驅(qū)動(dòng)流動(dòng)相，使得經(jīng)典液相色譜需要數(shù)日乃至數(shù)月完成的分離工作得以在幾個(gè)小時(shí)甚至幾十分鐘內(nèi)完成。1...

高效液相色譜法的原理：高效液相色譜(HPLC)法是以高壓下的液體為流動(dòng)相，并采用顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。高效液相色譜對(duì)樣品的適用性廣，不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中，可用氣相色譜分析的約占20%，而80%則需用高效液相色譜來(lái)分析。高效液相色譜和氣相色譜在基本理論方面沒(méi)有顯著不同，它們之間的重大差別在于作為流動(dòng)相的液體與氣體之間的性質(zhì)的差別。高效液相色譜法的構(gòu)造：可分為”高壓輸液泵”、”色譜柱”、"進(jìn)樣器”...

1、制備型加壓液相色譜，按照色譜柱和樣品量的大小，分為：（1）低壓液相色譜；（2）中壓液相色譜；（3）高壓液相色譜；2、低壓色譜（LPLC）柱壓一般低于5bar（或75psi）。低壓色譜一般是由蠕動(dòng)泵、進(jìn)樣閥和檢測(cè)器組成，可以連續(xù)化，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)的梯度淋洗和餾分收集等操作。色譜柱管一般是玻璃或聚合物材料的，長(zhǎng)度一般為240-440mm，內(nèi)徑為10-40mm。對(duì)于大多數(shù)在紫外區(qū)有吸收的物質(zhì)，光學(xué)檢測(cè)器很常用。填料一般使用軟質(zhì)的葡聚糖、瓊脂糖、纖維素、合成高聚物或離子交換劑，粒徑一般...

制備色譜是指采用色譜技術(shù)制備純物質(zhì)，即分離、收集一種或多種色譜純物質(zhì)。制備色譜中的“制備”這一概念指獲得足夠量的單一化合物，以滿足研究和其它用途。制備色譜的出現(xiàn)，使色譜技術(shù)與經(jīng)濟(jì)利益建立了聯(lián)系。制備量大小和成本高低是制備色譜的兩個(gè)重要指標(biāo)。其中，氣相制備色譜主要用于石油化工產(chǎn)品和揮發(fā)性天然產(chǎn)物的色譜純樣品制備。1、分析色譜的目的分析出混合物中一個(gè)（或者幾個(gè)）純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的，是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率，制備色譜的的進(jìn)樣品量很大，導(dǎo)致...